微生物在环境中无所不在;他们哪里有水存在。1增长他们的营养需求多种多样,可以满足原料用于制造水性涂料的湿阶段。188金宝搏bet官网新陈代谢的微生物(细菌、酵母和霉菌)对许多行业构成潜在威胁,水是用于产品制造或过程。

在涂料行业主要是细菌,有时酵母,负责wet-stage油漆产品的损坏。可以观察到微生物腐败恶臭味,凝胶,沉降,变质和变黑。2确定组生物负责损坏wet-stage油漆通常存在于水和土壤,以及天然粘土等原材料,颜料,TiO188金宝搏bet官网2等等。这些微生物的主要成员Enterobacteraceae家庭,等枸橼酸杆菌属,肠杆菌属埃希氏杆菌属物种,假单胞菌科,特别是假单胞菌。最常见的污染物。之后腐败等厌氧菌脱磷孤菌属。给严重感染产品特有的气味和在许多情况下变色。3

这是一种常用的练习计数集落形成单位(CFU)来确定微生物污染的严重性。CFU计数的帮助下完成商用浸幻灯片,营养媒体或大豆酪蛋白消化媒体。这些媒体,广泛应用于涂料行业,营养丰富,支持增长几个类型的微生物(细菌属于六大门世界的60 - 80组)。这些类媒体通常不支持许多其他细菌的生长,因此这些细菌的存在是被忽视的。4有报道暗示更多不同类型的细菌的增长可以提高通过稀释媒体的养分浓度。5本文提出,稀释的媒体(100次,200次,500次)或中度营养丰富的媒体(R2A和R3A)支持更多数量和类型的细菌在固化媒体比传统营养丰富的媒体没有稀释。支持这一假说,19原材料用于水性建筑涂料和四个水性装饰漆样品(6 - 188金宝搏bet官网12个月岁热)被认为是在这项研究中。

188金宝搏bet官网材料和方法

油漆样品

水性装饰漆样品40岁˚C 6个月(油漆样本1和2)12个月(油漆样品3和4)从各种来源收集。

涂料原材料188金宝搏bet官网

添加剂、填充剂和色素、增稠剂和过滤器从各种来源收集。以下原材料为本研究从各种来源是:六偏188金宝搏bet官网磷酸钠、聚丙烯酸钠盐(润湿剂)、非离子表面活性剂,以消泡器,乙二醇,三甘醇、羟甲基纤维素di-pentene,合并代理(酯醇)、丙烯酸增稠剂,48%的苯丙乳液,50%的纯丙烯酸乳液,不透明聚合物,伯胺、液氨、石英(10微米),滑石,粘土,碳酸钙,二氧化钛(r - 902)和二氧化钛(cr - 828)。

媒体

胰蛋白酶的大豆琼脂(TSA)和营养琼脂(NA)被用作营养丰富的媒体。商用R2A和R3A用作适度营养丰富的媒体。TSA和NA媒体与水稀释100 - 200倍,与琼脂凝固营养物媒体TSA 100年,运输安全管理局200年,分别为100年和200 NA NA。

文化条件和CFU计数

CFU计数被连续稀释油漆样本由1000次,和100年µl是放在每个媒体和消毒均匀的玻璃撒布机。盘子被孵化一个直立的位置在30˚C 24小时一个星期。佩特里盘子是用封口膜,以减少脱水的媒体在孵化。殖民地被数手动枚举每24小时7天快速增长的细菌的生长以及细菌生长缓慢。数是由使用永久性记号笔的不同颜色的墨水,以避免任何重叠的前一天的计数。

结果

观察到,一般来说,稀释媒体恢复细胞的数量高于未稀释的媒体在油漆和原材料用于生产颜料。188金宝搏bet官网有10 - 100倍增加数量的殖民地发展相比传统营养丰富的媒体(TSA, NA)(表1),观察到中度nutrition-containing媒体R2A和PCA也有助于增加CFU在稳固的媒体。虽然是一个折叠转变观察100倍稀释后,在200倍稀释恢复细菌菌落的数量只改变了最低限度。有趣的是,50%的纯丙烯酸乳液,不透明聚合物和48%苯丙乳液显示没有殖民地在营养丰富的媒体,而相同的样本显示2 - 3日志CFU计数增加稀释的媒体。填充剂和颜料也显示类似的模式。油漆样品3和4显示的增长3 - 4日志增加CFU计数即使在营养丰富的媒体,可能是因为这个油漆生产6个月之前。在所有的延伸部分,只有石英和云母没有任何日志级别不同细菌生长与营养丰富的媒体。原因可能是由于细菌的多样性在这些样品很穷。

讨论

在微生物中,术语“生存能力”和“cultivability”往往是相关的。许多细菌对各种环境压力,进入一个新颖的生理状态,细胞仍然可行,但不再是可培养的标准实验室媒体和被称为“可行但non-cultivable”(VBNC),而cultivability显然取决于所使用的媒介。

营养状况的一个主要原因不是检测VBNC在传统媒介TSA和NA。营养丰富的媒体可能会造成冲击,细菌细胞,因此现有枚举方法低估了微生物负载和多样性。6

2012年,代理等人报道Sphingomonas capsulata,Methylobacterium sp。,大肠杆菌434年摄影荧光假单胞菌写明ATCC 13525显示更高的平均改善复苏细胞暴露在水相比R2A(低营养的媒体)和TSA(类媒体)。7寻欢,Geldreich(1985)的研究中他们得出结论,R2A显示细菌计数显著高于其他营养丰富的传统媒体。81996年,詹森等人建立的cultivability海洋细菌的使用可以显著改善低营养的媒体。9

同样,在这项研究中更多的细胞恢复从一个稀释,低营养的培养基稀释比,营养丰富的媒介。在这项研究中也报道,moderate-nutrition媒体R2A和PCA显示复苏的细菌比传统营养丰富的媒体(TSA, NA)。50%的纯丙烯酸乳液,不透明聚合物和40%的苯丙乳液,细菌无法检测到正常营养丰富的媒体,而3日志增长在稀释的媒体报道。在测试延伸部分显示10 - 100日志级别不同细菌生长与营养丰富的媒体相比,而在油漆样本观察1和2没有多大的差别,也许是因为细菌的多样性两个样品非常贫穷。

VBNC状态很令人担忧,因为细菌细胞可以显示增强抵抗抗菌药物(主要是由于低代谢活动),复苏后保留其毒性。10防腐剂广泛用于保护乳剂和油漆从微生物的攻击。在制造业,VBNC细菌从各种原材料可能导致误判的正确和适当数量的杀生的剂量。188金宝搏bet官网此外,这些隐藏的细菌可以开发一个宽容这些防腐剂和可能是一个潜在的威胁到油漆的保质期。

引用

1。赫斯特,C.J.邻里和社区责任人:没有微生物是一个岛。手工环境微生物学,由c·j·赫斯特,第二版。编辑页6 - 8,华盛顿(2001);美国微生物学会。

2。保卢斯,w .目录的杀微生物剂保护的材料:一个手册,2005。荷兰。188金宝搏bet官网施普林格(2005)。

3所示。Gillatt, j .微生物腐败乳液涂料的制造及其预防。52-54 Paintindia 2011 61: 5日。

4所示。待价而沽,j .宏基因组:无教养的微生物基因组学的应用。微生物学和分子生物学评论,68 (4),669 - 685,(2004)。

5。Connon S.A.;Giovannoni,中华民国培养微生物高通量方法Very-Low-Nutrient媒体产生多样化的新海洋隔离。达成。环绕。Microbiol。2002;68:3878 - 3885。

6。Staley j.t;Konopka, a .原位测量活动中非光合微生物的水生和陆生的栖息地。为基础。启Microbiol。1985;39:321 - 346。

7所示。代理N.F.;布拉干萨,克里;摄影记者,开出信用证;Cerqueira l;阿尔梅达,c;Keevil漫画;维埃拉,M.J.提议的方法来估计营养细菌冲击效应。BMC Res笔记。8,5:422 (2012)。

8。寻欢,D.J.;Geldreich,一些新媒介的枚举和亚文化从饮用水细菌。:环境Microbiol。1985;49 (1):1 - 7。

9。詹森,公关;考夫曼,c.a;Fenical w·高恢复可耕种的细菌表面的海洋藻类。3月杂志。1996;126:1-7。

10。奥利弗,j . d .最近发现在病原菌可行但Nonculturable状态。《。启34岁,415 - 425,(2010)。